高氧-低氧悖论

有效的新陈代谢高度依赖于狭窄的氧气治疗范围。因此,低水平的氧气或缺氧是基因表达,代谢变化和再生过程(包括血管生成和对干细胞增殖,迁移和分化的刺激)最强大的诱导剂之一。降低的氧水平(低氧)或增加的氧水平(低氧)的检测是通过专门的化学感受器细胞和细胞水平的代谢变化来进行的,从而调节反应。有趣的是,游离氧浓度而不是绝对氧含量的波动可以在细胞水平上解释为缺乏氧。因此,反复的间歇性高氧可以诱导许多在低氧期间通常诱导的介体和细胞机制。这称为高氧-低氧悖论(HHP)。本文回顾了氧生理,缺氧引发的主要细胞过程以及HHP引发的一系列事件。

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抽象的

有效的新陈代谢高度依赖于狭窄的氧气治疗范围。因此,低水平的氧气或缺氧是基因表达,代谢变化和再生过程(包括血管生成和对干细胞增殖,迁移和分化的刺激)最强大的诱导剂之一。降低的氧水平(低氧)或增加的氧水平(低氧)的检测是通过专门的化学感受器细胞和细胞水平的代谢变化来进行的,从而调节反应。有趣的是,游离氧浓度而不是绝对氧含量的波动可以在细胞水平上解释为缺乏氧。因此,反复的间歇性高氧可以诱导许多在低氧期间通常诱导的介体和细胞机制。这称为高氧-低氧悖论(HHP)。本文回顾了氧生理,缺氧引发的主要细胞过程以及HHP引发的一系列事件。

1.简介

氧气是仅次于氢和氦的宇宙中含量第三高的元素,并且是地球上大多数生物的最主要的效应器。大约300万年前,在石炭纪,大气中的氧水平达到最大值的35%,这可能对大尺寸的动物和昆虫在这个时候作出了贡献[ 12]。如今,氧气已构成地球大气的20.8%,其协同作用的任何细微变化都会对哺乳动物生理各个层面产生巨大影响。维持氧气稳态的能力对于生存至关重要,并且所有哺乳动物生理系统都经过进化以确保向每个生物体中所有细胞供应的氧气达到最佳水平。这已经通过复杂的生理基础设施的发展而发生了变化,这些基础设施包括氧气输送(肺部),氧气输送载体(红细胞和血浆),氧气输送路径(血管系统)和泵(心脏)。这些系统在生物体内的发展和调节都为氧稳态提供了基础。
有效的新陈代谢高度依赖于狭窄的氧气治疗范围。因此,低水平的氧气或缺氧是基因表达,代谢变化和再生过程(包括血管生成和对干细胞增殖,迁移和分化的刺激)最强大的诱导剂之一。降低的氧(低氧)水平或升高的(高氧)氧水平通过特殊的化学感受器细胞和调节反应的细胞水平的代谢变化而发生。有趣的是,在细胞环境中,游离氧浓度而不是绝对氧含量的波动可以解释为缺乏氧。因此,氧浓度的间歇性增加可以诱导通常在缺氧期间诱导的许多介体和细胞机制。
在本文中,我们回顾了氧生理,缺氧引发的主要细胞过程以及HHP引发的一系列事件。

2.氧气稳态

我们人体的所有组织都依靠持续不断的氧气供应,其供应速度与不断变化的新陈代谢需求相匹配。氧气输送链从肺部开始,目的地是线粒体(图1)。氧气通过对流传递到气道和血管中。然后,它穿过肺泡-毛细血管膜扩散,并穿过毛细血管壁扩散到间质并到达目的地线粒体。在血液中,氧气以两种形式携带:与血红蛋白结合的部分和溶解在血浆中的游离部分。根据亨利定律,溶解氧的量与特定温度下的氧分压成正比[ 3。]。在生理常氧条件下,即在正常的吸入氧气含量(20.8%)下,大部分(高达99%)的氧气由血红蛋白携带,并且氧气的溶解量很小[ 4]。因此,红细胞的数量将主要影响氧气输送的总容量。但是,在氧气分压升高的情况下(例如呼吸纯氧和高压暴露期间),溶解量可能会变得很大。在所有情况下,扩散梯度都是氧气从等离子体到线粒体的驱动力。因此,游离的溶解级分对线粒体起主要作用。假定氧气在细胞膜上自由扩散。然而,最近的数据表明,水通道,例如水通道蛋白1(AQP-1),也可以作为氧气转运蛋白[ 5 ]。
在正常的稳定状态下,氧稳态是一个动态调节的过程。在给定时刻,生理性细胞对氧气的需求可能会根据组织需求而变化。例如,锻炼肌肉比放松肌肉对氧气的需求明显更高。因此,连续地调节向组织的氧气输送速率。
多种机制可使人体维持充足的氧气供应[ 6]。对缺氧的全身感觉和反应包括(a)颈动脉体球蛋白,动脉循环中的化学传感器,可以增加通气率;(b)和神经上皮体(NEB),它们是暴露于气管腔的细胞簇。迷走神经支配的分支点可扩张肺动脉,以优化通气-灌注交换。肾上腺素系统在缺氧时被激活,从而增加心输出量并选择性地向更重要的器官灌注血液。在器官水平,动脉因缺氧而扩张,以增加氧气的输送。肾脏也检测到氧合水平,肾脏调节促红细胞生成素的产生,以调节红细胞(RBC)的数量和载氧能力。如上所述,除了动态呼吸和代谢系统可以增加氧气的输送外,还必须在细胞水平上具有调节机制。这些对于在极端环境条件下以及系统性调节不足的病理/疾病状态下生存至关重要。
在细胞水平上,线粒体使用了80%的可用氧气,而其他细胞器仅使用了20%的可用氧气。作为主要的氧气消耗者和新陈代谢者,线粒体中的分压非常低,仅为1-3 mmHg(图1)。因此,线粒体是关键的氧气传感器以及重要的信号细胞器[ 7 ]。迄今为止,大多数证据都指向以下理论:线粒体通过电子传输链产生活性氧(ROS)信号,从而发出缺氧信号。当ROS被释放到膜间空间时,它们与酶,转录因子和翻译后反应的激活相互作用[ 8 ]。
另外,几个细胞可以通过独特的机制适应降低的氧气水平[ 6 ]。例如,在缺氧条件下,红细胞中的血红蛋白可以改变其形式和亲和力[ 4 ]。细胞色素P-450单加氧酶(CYP)包含大量同源的氧敏感蛋白,可氧化多种化合物。许多报道表明CYP代谢物有助于在全身微血管和内皮缺氧反应,并可能有助于缺氧性肺血管收缩[ 6910 ]。

3.缺氧诱导的细胞级联反应

如上所述,有效的代谢高度依赖于狭窄的氧气治疗窗口。然而,尽管成年哺乳动物的动脉氧分压约为100 mmHg,但在哺乳动物胎儿中,其约为40 mmHg。因此,缺氧是一个相对术语,最有用地定义为氧气输送或利用失败限制正常功能的状态。

3.1。缺氧诱导因子

氧气的低电平由所有的活细胞,其与一类酶称为脯氨酰羟化酶域(PHD)蛋白[开始的信号发送1112 ](图2)。在正常的氧气浓度下,这些PHD酶包括氧气敏感的羟化酶,这些羟化酶可将转录因子低氧诱导因子(HIF)的α亚基上的特定脯氨酸和天冬酰胺残基羟化。羟化后,HIF-1α亚基被E3泛素连接酶(也称为von Hippel-Lindau蛋白(VHLp))靶向,该蛋白诱导HIF-1α泛素化和降解。抑制HIF的因子(FIH)是另一种羟化酶,可将HIF的α亚基上的天冬酰胺残基羟化,从而使HIF转录因子失活。HIF是由HIF-1α,HIF-2α或HIF-3α亚基组成的异二聚体,它们与HIF-1β,HIF-2β和HIF-3β亚基二聚化,分别形成HIF-1,HIF-2和HIF-3因素。HIF-1α会在所有细胞类型中产生,而HIF-2α亚基则存在于特定细胞中,包括髓样细胞,肝实质,血管内皮,II型肺细胞和肾间质。虽然HIF-1和HIF-2充当缺氧转录反应的先导调节因子,但HIF-3的功能尚不清楚。虽然HIF1A基因在常氧条件下低水平组成性表达,在缺氧时其表达明显上调[ 13 ]。
HIF-1在低氧条件下稳定(无羟化酶抑制)(图2),可作为转录因子,调节100多个基因在缺氧条件下生存所必需的基因[ 14 ]。这些包括糖酵解酶,该酶允许以不依赖氧的方式合成三磷酸腺苷(ATP),这些酶可降低基础呼吸频率,并上调血管内皮生长因子(VEGF)诱导血管生成,从而改善组织灌注。与HIF-1不同,HIF-2调节iNOS(诱导型NO合酶)和其他支持成人组织氧合增加的因素,例如促红细胞生成素的产生[ 15]。除了调节在低氧环境的生存细胞代谢的需要,HIF-1可以打开或关闭键哺乳动物再生过程[ 161718 ]。在受控的哺乳动物模型中,已证明HIF-1的持续下调导致瘢痕形成反应和组织损失[ 16 ]。HIF-1在高度依赖氧的重要器官功能(如大脑和心脏)的再生和维持中也起着重要作用。对小鼠的研究表明,HIF表达的增加具有神经保护作用,并增强了再生作用,可以增强海马记忆并在中风后和脊髓损伤中诱导更好的神经再生[ 171920 ]。关于心脏,增加HIF表达发起来再生受损心肌和各种类型的损伤后改善心脏功能[所需的代谢过程1821 ]。

3.2。血管内皮生长因子(VEGF)

VEGF家族包含五个成员:VEGF-A,胎盘生长因子(PGF),VEGF-B,VEGF-C和VEGF-D。VEGF-A是VEGF家族中最知名的因子。所有VEGF因子都通过结合位于细胞表面的各自的酪氨酸激酶受体来诱导不同的细胞反应,从而诱导受体的二聚化,磷酸化和激活[ 22 ]。VEGF-A的产生是由HIF-1诱导的,而HIF-1则激活血管细胞以启动血管生成(新血管从现有血管中萌芽)和动脉生成(侧支血管重构以处理增加的血流,绕过血管的狭窄区域)。原始导管动脉)[ 1123]。此外,VEGF-A因子可诱导血管舒张活性,以及​​立即改善组织缺血所需的微血管通透性增加[ 11 ]。VEGF-A还刺激骨髓源性血管生成细胞(BMDAC)的动员,而后者又迁移至缺血组织并参与血管生成和动脉生成[ 11 ]。

3.3。西尔图因

Sirtuins是参与代谢调节的信号蛋白家族。沉默调节蛋白的活性包括单-二磷酸腺苷(ADP)-ribosyltransferase或脱酰基[ 2425 ]。在哺乳动物中,沉默调节蛋白7(SIRT 1-7)已经在不同的亚细胞区室发现:SIRT1,SIRT6和SIRT7位于细胞核内,SIRT2在细胞质中,和SIRT3,SIRT4,SIRT5和在线粒体[ 2425 ] 。SIRT1是参与各种机制调节细胞凋亡,炎症和衰老,这是与衰老有关的疾病有关[ 1426272829]。核能态和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD +)水平降低会降低SIRT1活性,从而导致pVHL水平降低和HIF-1α稳定。相反,SIRT1的过表达通过脱乙酰作用促进线粒体的生物发生,从而导致HIF-1α的激活[ 30 ]。在衰老过程中,在转录和转录后阶段,SIRT1的水平降低均被认为是主要的代谢途径,其减弱了线粒体的生物发生并引起了衰老相关疾病[ 14 ]。在小鼠模型中,SIRT1的过表达导致延缓衰老的表型和寿命的延长,而抑制SIRT1则使寿命的延长无效[ 31]。SIRT1 SIRT6或过度表达在许多鼠疾病模型中,包括癌症,2型糖尿病和心血管疾病[保护262832333435 ]。
含氧和氧化还原响应信号的换能器之间的串扰发生通过SIRT1-HIF相互作用[ 3637]。在缺氧期间,线粒体中NADH消耗的减少和糖酵解中NADH产量的增加会导致NAD + / NADH比率的降低,从而下调SIRT1转录。降低的SIRT1可以使HIF-1α乙酰化并激活它,并提供一个正反馈回路,在缺氧期间维持高水平的HIF-1活性。由于缺氧引起的代谢危机,HIF-1通过(1)诱导PDK-1抑制线粒体能量代谢,PDK-1抑制丙酮酸向乙酰辅酶A的转化,(2)通过c-Myc抑制抑制线粒体的生物发生,以及(3)降低线粒体转录因子A(TFAM),用于复制,转录,和线粒体生物发生的维护所需的[ 3839 ]。

3.4。线粒体生物发生

一生中保持足够的线粒体数量至关重要。线粒体质量控制是通过线粒体的过程,受损的线粒体的降解以及通过线粒体生物发生而产生新功能的线粒体的过程来进行的,线粒体的生物发生是通过原有线粒体的生长和分裂形成新的线粒体的过程。线粒体的生物发生对于维持大多数人类细胞的完整性至关重要,近年来,越来越多的证据表明它们在维持脑功能和神经退行性疾病中的重要作用[ 40 ]。
线粒体生物发生是一个复杂的过程,需要协调的双基因组(细胞和线粒体DNA)调节才能执行几个不同的过程,包括(1)线粒体内外膜合成,(2)线粒体编码蛋白的合成,(3)合成和导入核编码的线粒体蛋白,以及4)复制线粒体DNA(mtDNA)。几种细胞信号通路紧密调节线粒体的生物发生。AMP激活激酶(AMPK)-PGC-1a轴和Sirtuin 1(SIRT1)-PGC-1a是调节线粒体生物发生的两个主要途径。AMPK可以通过生理刺激例如运动,饥饿,并且被激活的瞬态缺氧[ 41424344 ]。
AMPK和HIF信号通路之间存在相当大的重叠,因为两者都涉及精力充沛的压力,尽管两者之间的关系很复杂,相反的结果和合作的结果都取决于环境[ 45 ]。如前所述,AMPK是线粒体生物发生的有效刺激剂,在常氧条件下可恢复ATP稳态。但是,如上所述,一旦AMPK活化在低氧条件下发生,即精力充沛的压力,额外的线粒体生物发生和耗氧将进一步降低氧气的利用率并加剧压力。因此,长时间缺氧下的HIF信号传导通常会降低线粒体的生物发生和质量[ 45 ]。

3.5。干细胞

干细胞(SC)是未分化或部分分化的细胞,可以分化为各种类型的细胞并无限分裂,从而产生更多的相同干细胞。在哺乳动物中,干细胞的主要种类包括造血干细胞(HSC)和补血间充质干细胞(MSC),造血干细胞可补充血液和免疫细胞,基底细胞可维持皮肤上皮,骨髓间充质干细胞可维持骨骼,软骨,肌肉和脂肪细胞。还有更多的有针对性的SC亚组,包括神经元干细胞(NSC),它们持续存在于成人大脑的受限区域,并在整个人的一生中继续产生神经元。神经干细胞可以产生神经细胞及其支持细胞,少突胶质细胞和星形胶质细胞[ 46]。除了其分化能力外,SCs还具有多能性特性,包括抗炎作用,使其成为各种疾病的潜在治疗候选物[ 47 ]。
在正常情况下,SC处于可逆的静止状态,即处于暂时的细胞周期停滞状态[ 48 ]。当它们静止时,它们表现出改善的抗应力性和增强的生存能力。氧具有干细胞增殖和分化[的调节中起重要作用484950 ]。短期缺氧可诱导SC增殖,迁移和分化能力[ 4850 ]。此外,缺氧还调制MSC的旁分泌活性,引起各种分泌的因子,例如VEGF和外来体,也具有重要的血管生成和抗炎作用[上调505152 ]。由缺氧发挥其对细胞的作用机制主要是由HIF-1调节的和相关的降频级联的蛋白表达[ 4850 ]。

4.高氧低氧悖论

如上所述,缺氧是通过升高HIF,VEGF,Sirtuin,线粒体代谢变化以及SC增殖和迁移而引起的线粒体代谢变化的自然触发因素。然而,在细胞水平上,氧水平的波动可以触发通常由缺氧引起的细胞级联的认识,允许使用间歇性高氧刺激组织再生而没有缺氧的有害影响。这被称为“高氧-低氧悖论”(图3)。
在临床实践中,间歇性高氧血症可通过高压氧疗法(HBOT)产生。HBOT包括在超过1个绝对大气压(ATA)的压力下吸入100%的氧气,以增加溶解在人体组织中的氧气量。在HBOT期间,动脉O 2张力通常会超过1500 mmHg,并且组织中会发生200–400 mmHg的水平。在正常人中,在正常环境中(在1ATA处为20.8%的氧气),血红蛋白几乎完全饱和(94-99%)。因此,当处于高压环境中时,效果仅在溶解氧中。如上所述,溶解的氧是负责从毛细管到线粒体的扩散梯度的部分。在文章的以下部分中,我们将回顾反复反复的高氧血症引起的细胞级联反应。

4.1。缺氧诱导因子

已经提出,在氧气供应,而不是恒定的低氧或高氧的相对变化对HIF表达[更占优势的效果535455 ]。根据这个假设,将细胞解释从常氧缺氧的变化或以下一个高氧暴露作为氧短缺变回常氧和诱导HIF-1调节的基因合成[ 535455 ]。尽管人们对引起HIF表达的细胞级联反应的理解不断增加(如下所述),但尚不完全了解吸入氧气的精确水平及其反复给药的确切时间范围。
所提出的机制在常氧后曝光高氧涉及ROS可用性和清除剂,增加HIF的可用性,如谷胱甘肽合成酶和超氧化物歧化酶(SOD)的酶[ 535455 ]。如上所详述(图2),在常氧条件下,与清除剂相比,氧及其ROS衍生物的比例更高时,大多数HIF-1α亚基会被PHD羟基化。这导致它们被VHLp泛素化,并因此导致蛋白酶体中的HIF-1α降解。在缺氧条件下,氧及其ROS衍生物的利用率较低,HIF-1α不会被VHLp羟基化和泛素化,更多的HIF-1α可以进入细胞核,并与HIF-1β二聚形成活性HIF启动子。在高氧,提高了氧可用性水平将提高产生活性氧和产生活性氧清除剂,包括谷胱甘肽过氧化物酶,超氧化物歧化酶,以及其他ROS清除剂[ 5657585960]。根据以上累积数据,我们的观点是,这种清除剂水平在单次高氧暴露后是有限且逐渐增加的,因此需要重复暴露才能获得显着的清除活性(图2)。从单次高氧暴露恢复为正常氧后,ROS /清除能力之比将很高,从而导致所有HIF分子泛素化。反复高氧暴露后恢复正常氧水平时,清除剂的水平增加,其固有的消除半衰期(T 1/2)也明显长于ROS T 1/2。因此,ROS /(清除能力)之比将很低,类似于低氧状态。具有增强的清除能力,更少的ROS可用于结合PHD,更少的HIF-α亚基降解,继而将进入细胞核以与HIF-1β结合并产生活性HIF基因启动子。意思是,间歇性高氧可通过降低ROS /清除能力的比值而产生低氧模拟状态,而不会发生低氧。
重复间歇高氧通过高压氧对HIF表达的影响表现在不同类型的器官和细胞[的57586162 ]。例如,高压氧可诱导HIF表达和在受伤的大脑[及其相关再生级联5863 ],胃肠道[ 57 ]和肝脏[ 6162 ]。此外,高压氧诱导不同类型的HIF和在不同类型的干细胞的表达[ 5964]。与施加的压力,时间和HBOT暴露次数有关的剂量反应曲线及其与HIF表达的关系仍不完全清楚,需要进一步研究以找到最佳的HBOT方案。应当注意的是,当高压氧被施用给缺血性组织,过表达HIF,组织缺氧被反转和纠正,因此过表达的HIF朝向归一化的基线[减小656667686970]。此外,当HBOT用作缺氧的预适应疗法(通过HIF诱导)时,组织将更好地耐受缺血性损伤,诱导的缺血性损伤更少,并且损伤后HIF的总体表达将低于相同损伤的预期值[ 71]72 ]。

4.2。VEGF与血管生成

VEGF的产生是由HIF-1诱导的,然后继续刺激血管生成和动脉生成所需的细胞过程(如上所述)。利用HHP,间歇性高氧暴露后VEGF显着增加。有从临床前以及来自临床研究表明重复高压氧诱导的会话用于血管生成,VEGF的表达,和内皮祖细胞(EPCs)的关键因素越来越多的证据61737475]。与在缺血条件下诱导的VEGF不同,在高氧刺激下诱导VEGF可以促进呼吸正常空气的低氧/缺血性组织中的血管生成。临床研究已经证实,重复每日高压氧会话增强VEGF,内皮祖细胞的循环水平,并提高患者缺血区中的血流慢性外周动脉闭塞性疾病,有或没有非愈合的伤口[ 73747576 ]。
使用高氧刺激以诱导血管生成对被氧剥夺,即使在正常条件下的器官关键如人脑[ 7778 ]。因此,为了实现脑血管生成和再生过程,除了通过循环高氧暴露实现的VEGF诱导外,还必须增加氧气的输送。高压氧可以启动细胞和血管修复的机制来诱导大脑血管生成和改善受损的脑区域[脑血流798081 ]。

4.3。西尔图因

SIRT1通过使线粒体生物发生因子PGC-1α脱乙酰化的能力而充当代谢传感器。期间高氧时,NAD + / NADH比率通过三羧酸循环和线粒体代谢增加,引发SIRT1 [ 8283 ]。已知SIRT1使FOXO3a脱乙酰,通过调节SOD2和CAT诱导抗氧化反应。FOXO3a被进一步证明可调节线粒体基因表达,从而调节ROS水平[ 82 ]。SIRT1调节PGC-1α的乙酰化,PGC-1α是线粒体生物发生的主要调节剂[ 83 ]。SIRT1与其他sirtulins似乎是抵抗氧化应激和ROS形成的重要细胞防御机制不可或缺的一部分。
间歇性高氧暴露会产生ROS分子,该分子通过激活有丝分裂原激活的蛋白激酶(MAPK)来增加细胞内SIRT-1的活性[ 84 ]。在几种动物模型中评估了间歇性高氧暴露的影响。严等人。评价在通过大脑中动脉闭塞诱导局部脑缺血模型,也对进行缺氧缺糖损伤[原代培养的皮层神经元的高压氧上SIRT1效果8485 ]。他们的发现表明HBOT的神经保护作用是通过增加SIRT1 mRNA和蛋白质表达来介导的。HBOT的神经保护作用被SIRT1抑制剂和SIRT1敲低大鼠削弱[ 84]]。在另一只在大脑中动脉闭塞后的高血糖大鼠中进行的研究中,HBOT诱导了ATP / NAD和SIRT1和SIRT2通路的激活,从而导致出血转化的减弱,脑梗塞以及神经功能的改善[ 86 ]。类似的结果表明,SIRT1介导了HBOT的神经保护作用在具有术后认知功能障碍的中年小鼠中得到证实[ 87 ]。

4.4。线粒体

游离溶解氧的任何变化都会产生扩散梯度,该扩散梯度会通过产生ROS信号分子而直接影响线粒体传递和感知的氧。因此,可以将由HBOT产生的溶解氧的间歇性增加与“强间歇训练”相比较,并具有预期的累积效果以及反复暴露。在经过精心设计的小鼠模型研究中,研究表明,在锻炼训练中添加间歇性高压暴露可通过促进氧化和糖酵解能力以及增加横纹肌线粒体生物发生中涉及的蛋白质的表达来进一步提高耐力性能[ 88]。]。在人类中,与单独的运动训练相比,将HBOT与运动训练方案相结合可诱导更好的心肺健康[ 89 ]。
关于大脑,ROS被认为具有重要的代谢作用,并且ROS在脑中的主要来源是线粒体[ 90 ]。通常,线粒体消耗的氧气的1-2%转化为O -1和相关的ROS代谢产物,例如过氧化氢(H 2 O 2)和过氧亚硝酸盐(ONOO-)[ 91 ]。O -1和相关的ROS形成与氧分压成正比,并且在高压下乘以暴露持续时间。暴露可能会诱发癫痫性发作形式的高神经活动[ 90]]。Gutsaeva等人进行的一项研究表明,惊厥前的HBOT剂量可在海马体中诱导明显的线粒体生物发生[ 91 ]。NRF-2基因表达,TFAM基因表达和线粒体基因转录的增加介导了海马细胞的反应[ 91 ]。
近年来,存在关于可能性和对神经元功能的适当维护和细胞-细胞信号传导[星形胶质细胞和神经元之间的线粒体转移的重要性越来越多的证据9293 ]。神经元可以释放受损的线粒体并将其转移至星形胶质细胞以进行处置和回收[ 92 ],星形胶质细胞可以释放进入神经元的功能性线粒体[ 93 ]。由Borlongan和Lippert进行的一项研究表明,HBOT可以促进线粒体从星形胶质细胞向更易发炎的神经元细胞的转移[ 94]]。线粒体从星形胶质细胞向神经元的转移使神经元对炎性损伤更具弹性。这些发现表明神经胶质串扰的一种新的线粒体机制可能有助于HBOT诱导的内源性神经保护和神经恢复机制。

4.5。干细胞

缺氧和间歇性高氧都会增加HIF及其下游基因表达,包括干细胞因子(SCF)[ 95 ]。从临床前和临床研究不断增长的数据表明通过高压氧对干细胞[增殖和动员重复间歇高氧的累积效应5996979899100101102103104105106107108109110111112 ]。从糖尿病伤口和创伤后的脑损伤的患者的临床研究已经表明,重复高压氧会话增加循环(动员)干细胞的相关性中与临床改善[ 969798 ]。
关于干细胞的亚型,它证明了高压氧促进神经干细胞的增殖[ 99100101102103104105 ],刺激血管生成干细胞生长和分化[ 59106 ],刺激结肠干细胞和诱导粘膜愈合[ 107 ],提高了间充质干细胞[的成骨特性108109 ],并且增加了成肌细胞生长速度,并提高肌肉再生[ 110111112 ]。
通过间歇性高氧而非缺氧刺激干细胞的主要优点是,与任何其他再生过程类似,干细胞的增殖和分化是能量依赖性的,并且不能在低氧环境中完成。氧气对于与再生作用相关的干细胞至关重要,这一事实已在不同的研究中得到了证实,该研究比较了注射或不注射HBOT的干细胞的结果。使用高压氧除了干细胞注射的电位增加值被认为在多种组织中,包括脑[ 113114 ],脊髓和外周神经[ 115116 ],心肌[ 117118 ],和糖尿病性伤口[119 ]。在所有这些研究中,将HBOT添加到干细胞注射中具有协同有益的作用。

4.6。氧气中毒

尽管像其他活性成分或药物一样,高剂量的氧气疗法被认为是安全的,但它可能是有害的并导致氧气中毒。长时间暴露在高氧压下以及ROS与清除剂之间长期不平衡会导致膜脂质过氧化以及酶抑制和调节,这在中枢神经系统(CNS)中最常见,这会导致神经元代谢及其相关电活动的改变[ 120 ]。正如1878年首次提出的那样,呼吸中的高压氧会导致巨大的癫痫发作[ 121 ]。对氧气毒性相对敏感的另一个器官是肺。肺氧中毒可表现为胸闷,咳嗽和肺功能可逆性下降[ 122]]。
中枢神经系统和肺毒性都取决于氧气的分压和暴露时间[ 123 ]。因此,今天使用的新HBOT协议包括每天重复进行,限于60–90分钟,氧气分压不超过2.4 ATA,以及每20–30分钟进行空气制动。使用这些新的协议,高压氧被认为是安全的,而这两个肺和氧气毒性是非常罕见的[ 124125126 ]。在最近的62614个高压会话分析,在高压会话癫痫发作的总发生率0.011%(1:8,945个会话)[ 124125]。另外,在没有慢性肺部疾病的患者中,当前使用的HBOT方案在60次重复暴露后不会引起任何肺毒性或肺功能变化[ 126 ]。

5.总结

正如爱因斯坦的“相对论”解释了宇宙的基本物理方面一样,在微观宇宙中也可以找到相对论,即在细胞水平上的微观环境解释。总结在图3中,最缺氧引发细胞级联可以通过间歇性高氧,即所谓的“高氧缺氧悖论”所诱导。HIF,VEGF,SIRT,线粒体的生物发生以及干细胞的增殖和迁移都可以通过“生物愚弄”具有某些间歇性高氧方案的细胞来诱导。即使尚未在临床实践中发现确切的剂量反应曲线,某些HBOT方案已证明诱导了受损的组织再生。

 

高压氧疗法可增加端粒的长度并减少离体血细胞的免疫衰老:一项前瞻性试验

新闻

https://www.medsci.cn/article/show_article.do?id=a349203e1892

简介:衰老的特征是生理能力的逐渐丧失。在细胞水平上,衰老过程的两个关键标志包括端粒长度(TL)缩短和细胞衰老。使用某些高压氧疗法(HBOT)反复进行的间歇性高氧暴露可引起再生效应,这种效应通常在缺氧期间发生。当前研究的目的是评估HBOT是否会影响正常,非病理,老龄成年人口中的TL和衰老细胞浓度。

方法:招募了35名64岁及以上的健康独立生活的成年人,每天接受60次HBOT暴露。全血样品收集基线,在30和60,最后HBOT会议之后会话,1-2周。评估外周血单个核细胞(PBMC)端粒的长度和衰老。

结果:HBOT后,T辅助细胞,T细胞毒性,天然杀伤细胞和B细胞的端粒长度显着增加了20%以上。最显著变化是在B细胞,其在30增加注意到会议上,60由25.68%±40.42(p值= 0.007),29.39%±23.39(p值= 0.0001)和37.63%±52.73(对会话和交高压氧= 0.007)。

HBOT后衰老的T辅助细胞数量显着减少-37.30%±33.04(P <0.0001)。HBOT后T细胞毒性衰老细胞百分比显着下降-10.96%±12.59(p = 0.0004)。

总之,该研究表明,HBOT可能诱导明显的衰老作用,包括显着增加衰老人群的端粒长度和衰老细胞的清除率。

介绍

衰老的特征是生理完整性的逐渐丧失,导致功能受损以及对疾病和死亡的敏感性。这种生物恶化被认为是尤其是癌症,心血管疾病,糖尿病和阿尔茨海默氏病的主要危险因素。在细胞水平上,衰老过程有两个关键标志:端粒长度的缩短和细胞衰老[ 1 ]。

端粒是位于染色体末端的串联核苷酸重复序列,可维持基因组稳定性。端粒在复制(有丝分裂)过程中会缩短,这是由于固有的无法完全复制落后的DNA链末端的原因[ 2 ]。端粒长度(TL),4至15个碱基之间测量,逐渐缩短每年由〜20-40个碱基,并与不同的疾病,低物理性能和大脑[的皮质变薄相关联3 – 5 ]。当TL达到临界长度时,细胞将无法复制并发展为衰老或程序性细胞死亡[ 6 ]。Goglin等。证明,拥有更短TL的成年人死亡率增加[ 7]。缩短TLS可直接遗传性状,但一些环境因素也与缩短TL包括应激相关,缺乏身体耐力活动,过量身体质量指数,吸烟,慢性炎症,维生素缺乏和氧化应激的289 ]。

细胞衰老是细胞周期的停滞,这可能是由端粒缩短[ 10 ]以及其他与TL相关的衰老相关刺激(例如非端粒DNA损伤)引起的[ 1 ]。衰老的主要目的是通过触发受损细胞通过免疫系统的清除来防止受损细胞的繁殖。衰老细胞随着衰老的积累反映出这些细胞的生成增加和/或它们的清除率降低,这反过来加剧了损害并加剧了衰老[ 1 ]。

越来越多的研究身体已经发现了几个药理学试剂,可以降低端粒缩短率[ 1112 ]。几个生活方式干预包括耐力训练,饮食和补充剂靶向细胞代谢和氧化应激已经报道相对小的效果(2-5%)上TL 3, [ 289 ]。

高压氧疗法(HBOT)在高于一个绝对大气压(ATA)的环境压力下利用100%的氧气来增加溶解在人体组织中的氧气量。重复间歇高氧暴露,使用某些HBOT协议,可诱导通常在高氧环境缺氧时发生,所谓的高氧缺氧悖论[生理效应13 – 16 ]。此外,最近有研究表明,HBOT可以通过涉及脑血流区域变化的机制来诱导健康衰老成年人的认知增强[ 17]。]。在细胞水平上,已证明HBOT可以诱导缺氧诱导因子(HIF),血管内皮生长因子(VEGF)和sirtuin(SIRT)的表达,干细胞增殖,线粒体生物发生,血管生成和神经发生[ 18 ]。但是,迄今为止,尚无研究检查HBOT对TL和衰老细胞积累的影响。

当前研究的目的是评估HBOT是否会影响成年人的TL和衰老样T细胞。

结果

35个人被分配到HBOT。五名患者未完成基线评估,被排除在外。所有完成基线评估的30名患者均完成了干预措施。由于血液样本质量低(细胞数量少或技术人员错误),端粒分析中排除了4例患者,衰老细胞分析中排除了10例患者(图1)。表1提供了患者被排除后的基线特征和队列比较。三组之间无显着差异(表1)。

患者流程图。

图1. 患者流程图。

表1.基线特征。

HBOT 端粒分析 衰老分析 P值
ñ 30 25(83.3%) 20(66.6%)
年龄(岁) 68.41±13.2 67.56±14.35 66.70±16.00 0.917
体重指数 26.77±3.20 26.89±3.34 27.14±3.81 0.946
雄性 16(53.3%) 13(52.0%) 10(50.0%) 0.987
雌性 14(47.7%) 12(48.0%) 10(50.0%) 0.987
全血细胞计数
血红蛋白 6.33±1.25 6.57±1.15 6.58±1.29 0.707
白血细胞 14.02±1.40 13.92±1.35 13.97±1.49 0.969
%PBMC 39.96±6.75 39.25±6.64 38.59±6.63 0.774
血小板 239.87±1.39 244.08±43.0 254.05±41.4 0.559
慢性病
心房颤动 4(13.3%) 4(16.0%) 2(10.0%) 0.841
甲状腺功能减退 4(13.3%) 4(16.0%) 3(15.8%) 0.956
阻塞性睡眠呼吸暂停 4(13.3%) 4(16.0%) 3(15.0%) 0.961
哮喘 1(3.3%) 1(4.0%) 0 0.680
前列腺增生症 7(23.3%) 5(20.0%) 6(30.0%) 0.733
格尔德 3(10%) 2(8.0%) 2(10.0%) 0.961
骨质疏松症 5(16.7%) 5(20.0%) 4(20.0%) 0.936
风湿性关节炎 1(3.3%) 0 1(5.0%) 0.561
骨关节炎 7(23.3%) 4(16.0%) 5(25.0%) 0.755
糖尿病 3(10%) 3(12.0%) 2(10.0%) 0.966
高血压 7(23.3%) 5(20.0%) 5(25.0%) 0.918
血脂异常 16(53.3%) 14(56.0%) 12(60.0%) 0.897
缺血性心脏病 2(6.7%) 1(4.0%) 2(10.0%) 0.725
吸烟史 10(33.3%) 8(32.0%) 7(35.0%) 0.978
慢性药物
反聚集 8(26.7%) 6(24.0%) 5(25.0%) 0.974
ACE抑制剂/ ARB阻滞剂 6(20%) 6(24.0%) 6(30.0%) 0.720
Beta阻滞剂 5(16.7%) 5(20.0%) 3(15.0%) 0.901
钙阻滞剂 3(10%) 3(12.0%) 2(10.0%) 0.966
阿尔法阻滞剂 7(23.3%) 5(20.0%) 6(30.0%) 0.733
利尿剂 2(6.7%) 1(4.0%) 1(5.0%) 0.906
他汀类 10(33.3%) 9(36.0%) 7(35.0%) 0.978
口服降糖 1(3.3%) 1(4.0%) 1(5.0%) 0.958
双膦酸盐 1(3.3%) 1(4.0%) 1(5.0%) 0.958
质子泵抑制剂 3(10%) 3(12.0%) 3(15.0%) 0.726
激素 3(10%) 3(12.0%) 2(10.0%) 0.966
苯二氮卓类 3(10%) 2(8.0%) 1(5.0%) 0.816
精神病研究所 5(16.7%) 5(20.0%) 3(15.0%) 0.990

端粒长度

与基线相比,第30会议和HBOT后T辅助端粒长度显着增加21.70±40.05(p = 0.042),23.69%±39.54(p = 0.012)和29.30±38.51(p = 0.005) )(图2)。但是,重复测量分析显示出不显着的趋势(F = 4.663,p = 0.06,表2图2)。

端粒长度随HBOT变化。 平均值+ SEM * p

图2. 端粒长度随HBOT变化。平均值+ SEM * p <0.05,** p <0.01,*** p <0.001。

表2. HBOT后端粒长度和衰老细胞的变化。

与基线相比,B细胞的端粒长度在30显著增加会议上,60会议和25.68%-HBOT交±40.42(p值= 0.007),29.39%±23.39(p值= 0.0001)和37.63%±52.73( p = 0.007)(图2)。重复测量分析显示了显着的组内效应(F = 0.390,p = 0.017,表2图2)。

与基线相比,第30会议(p = 0.045)和第60会议的自然杀伤细胞端粒长度显着增加了20.56%±33.35(p = 0.013)。HBOT后,HBOT后端粒长度增加了22.16%±44.81(p = 0.06,表2图2)。重复测量分析表明,在第30疗程后没有其他显着影响(F = 0.812,p = 0.391)。

与基线相比,细胞毒性T细胞在第30会议上没有显着增加,增幅为18.29%±45.62(p = 0.11),随后在第60会议上显着增加了24.13%±40.88 (p = 0.0019) HBOT后为19.59%±33.98(p = 0.023)。重复测量分析表明,在第30疗程后,没有其他明显的影响(F = 1.159,p = 0.310,表2图2)。

衰老细胞

有在衰老T-辅助细胞的数量在30非显著下降会话,并且60分别由-19.66%±80.03(p值= 0.09)和-11.67%±94.30(p值= 0.20)会话。但是,HBOT后衰老的T辅助者数量显着下降-37.30%±33.04(P <0.0001,图3)。重复测量分析显示,即使在第30次治疗后仍具有显着的连续作用,并具有组内作用(F = 8.547,p = 0.01,表2图3)。

HBOT导致衰老细胞发生变化。 平均值+ SEM * p

图3. HBOT引起的衰老细胞变化。平均值+ SEM * p <0.05,** p <0.01,*** p <0.001。

在第30HBOT会议上,T细胞毒性衰老细胞百分比显着下降-12.21%±8.74(P <0.0001),在60HBOT会议上(0.002)下降-9.81%±9.50和-10.96%±12.59(p = 0.0004) HBOT后)(表2图3)。重复测量分析显示,即使在第30次治疗后仍具有显着的连续作用,具有组内效应(F = 6.916,p = 0.018,表2)。

HIF-1α

在第60会议上,HIF-1alpha水平从10.54±3.39增加到19.71±3.39 (p = 0.006),其中HBOT后2周的水平为16.81±7.65,与基线无显着差异(p = 0.16)。

讨论

在这项研究中,首次在人类中发现,在老龄化人群中,每天重复进行HBOT疗程可使PBMC端粒长度增加20%以上,其中B细胞的变化最为显着。此外,HBOT使衰老细胞的数量减少了10-37%,其中T辅助衰老细胞受到的影响最大。

已经观察到端粒长度和生活方式改变之间的大量关联。这导致了几项干预性研究,包括饮食,补品(例如omega-3和核桃),体育锻炼,压力管理和社会支持。一项对认知健康的老年人进行的为期两年的试验,使用富含核桃的饮食,与对照饮食相比,保留端粒长度的趋势不明显[ 19 ]。在另一项评估对老年人进行十二周低频爆炸性抵抗训练的效果的研究中,干预组的端粒长度得到了更好的保留,而没有显着增加[ 20]。]。最近的一项研究发现,有氧耐力训练或六个月的高强度间歇训练可使端粒长度增加5%[ 21 ]。额外的减肥,瑜伽和压力管理技术未能显示端粒长度的显着变化[ 22 – 25 ]。然而,大多数这些研究已显示抗氧化活性和端粒酶活性[之间显著相关性22 – 25 ]。

尽管许多遗传和环境因素与端粒缩短有关,但最常见的提示机制是氧化应激。氧化应激可能是由于活性氧(ROS)与细胞清除剂的产生不平衡而引起的。端粒对氧化性DNA损伤高度敏感,后者可导致端粒缩短和功能障碍[ 26 ]。氧和/或氧化应激与端粒长度之间的关系在过去的几十年中一直存在争议。人类细胞培养研究一致表明,轻度的氧化应激会加速端粒缩短,而抗氧化剂和自由基清除剂会降低缩短速率并延长细胞增殖寿命[ 27]。对病理状况(例如糖尿病,炎性疾病,帕金森氏病)的一些临床研究表明,氧化应激标记,活性氧清除剂水平和端粒长度之间存在相关性[ 28 ]。然而,健康的个体没有显示出相似的结果[ 29 ]。

以前已经有人提出将细胞培养物暴露于高压环境中会诱导明显的氧化应激和过早的细胞衰老[ 30 ]。但是,这是基于高压培养箱中生长的分离细胞,而不是像本研究中那样基于人类的复杂生物系统。与目前的研究相似,先前对暴露于强高压氧的潜水者进行的为期一年的前瞻性观察研究显示,白细胞中端粒的伸长显着[ 31 ]。如在当前的研究中所使用的,高压氧协议利用由重复间歇高氧暴露致的影响,即所谓的高氧缺氧悖论[ 1318]。这些间歇性的高氧暴露引起适应性反应,包括增加抗氧化剂基因的上调[ 32 ]和产生抗氧化剂/清除剂,以适应增加的ROS生成,从而导致ROS /清除剂的比例逐渐变得与正常氧气环境下的比例相似。但是,由于清除剂消除半衰期(T 1/2)明显大于ROS的T 1/2,因此在重复常高氧暴露后,恢复正常氧水平后,清除剂的水平显着提高,抗氧化活性提高[ 13]18]。因此,类似于体育锻炼和热量限制,每天重复进行HBOT协议可能会引起兴奋现象。单个曝光增加ROS产生剧烈,引发抗氧化反应,并用重复暴露,响应变得保护[ 1318 ]。

另外,间歇性的高氧暴露引起许多在缺氧期间发生的生理反应[ 13 ]。HBOT诱导称为低氧诱导因子(HIF)的转录因子的释放,并增加其稳定性和活性[ 14 ]。反过来,HIF诱导细胞级联反应,包括血管内皮生长因子和血管生成诱导,线粒体生物发生,干细胞动员和SIRT1活性增加[ 18 ]。我们的研究证实,重复的HBOT暴露会诱导HIF表达增加,而在非单声环境下,HOT的水平会随着正常水平的降低而逐渐降低。

目前,在动物模型中已开发出许多通过遗传或药理学方法(衰老药)去除衰老细胞的干预措施,并正在等待人类的安全性和有效性评估[ 33 ]。当前的研究提出了一种非药理学方法,可用于减少衰老细胞数量的临床安全性概况。我们的协议包括在2 ATA进行60次100%的氧气处理,包括每次使用三个空气中断,以利用高氧低氧悖论并使氧气中毒的风险最小化。有趣的是,TL和衰老细胞减少峰值在30会议。但是,与施加的压力,时间和HBOT暴露次数有关的剂量反应曲线及其与HIF表达及其相关的再生效应的关系仍不完全清楚,需要进一步研究以找到最佳的HBOT方案。

高压氧疗法是一种针对非愈合伤口,放射线损伤以及不同的缺氧或缺血事件(例如一氧化碳中毒,感染等)的行之有效的治疗方式。近年来,从临床前一个越来越多的证据以及临床试验表明高压氧用于治疗神经适应症,包括特发性突发性感觉神经性听力损失[功效34 ],卒中后和后创伤性脑损伤[ 35 – 41 ],中枢致敏综合征如纤维肌痛综合征[ 4243 ]和年龄相关的认知衰退[ 17 ]和动物阿尔茨海默氏病的模型[ 44]。本研究首次旨在评估无任何功能受限疾病的衰老人类对细胞水平的生理影响。

研究局限性

当前的研究有几个局限性和需要考虑的优点。首先,必须考虑有限的样本量。第二,缺乏对照组。但是,这项研究表明,在TL和衰老细胞清除方面,令人印象深刻的结果在其他干预措施中均未观察到。此外,我们队列的基线端粒长度值与老龄化人群的预期值[ 45 – 47]。第三,效果的持续时间有待长期随访确定。第四,由于选择了用于血液保存和评估的方法,因此未评估端粒酶活性。但是,应该强调一些优势。在这项研究中,CD28用作衰老细胞的生物标志物,而CD57不能用作T细胞衰老的确认性标志物。在特定的白细胞群体上评估生物标志物,而不是将整个PBMC用作一组。对孤立的HBOT效果进行了测量,并对参与者进行了监控,以确保他们没有改变生活方式(如营养和运动),用药或任何其他可能造成混淆的干预措施。

总而言之,该研究表明,HBOT可以诱导明显的衰老作用,包括端粒长度的显着增加和衰老群体中衰老细胞的清除。

材料和方法

科目

入选了三十五名未发生病理性认知减退的成年人,年龄在64岁及以上,他们以良好的功能和认知状态独立生活。该研究在2016年至2020年之间在以色列的Shamir(Assaf-Harofeh)医疗中心进行。被纳入的患者在被纳入之前的最后一年没有心脏或脑血管局部缺血的病史。排除标准包括:在过去三个月中因任何原因先前接受过HBOT治疗,在过去一年中有任何恶性病史,任何病理性认知功能下降,严重的慢性肾衰竭(GFR <30),不受控制的糖尿病(HbA1C> 8,禁食)血糖> 200),免疫抑制剂,MRI禁忌症(包括BMI> 35),积极吸烟或肺部疾病。

学习规划

该研究方案已获得以色列沙米尔医学中心的机构审查委员会的批准。这项研究是一项前瞻性临床试验。签署知情同意书并进行基线评估后,将受试者分配到HBOT。在基线,治疗方案的一半(30治疗),最后一次HBOT治疗的当天以及HBOT治疗后1-2周评估测量点。

该研究队列仅包括接受HBOT治疗的患者,这是在以色列Shamir医学中心研究的较大的正常衰老人群的一部分(NCT02790541 [ 17 ])。

干预措施

HBOT协议在Multiplace Starmed-2700实验室(德国HAUX)中进行管理。该协议包括60个每日课程,三个月内每周五个课程。每节课包括在2ATA处通过口罩呼吸100%的氧气90分钟,每20分钟休息5分钟。压缩/减压速率为1米/分钟。在试验期间,不允许改变生活方式和饮食习惯,也不允许调整药物治疗。

血液样本

使用标准技术,在基线,HBOT方案的一半(30疗程),最后一次HBOT疗程的一天(60疗程)和术后1-2周将全血样品收集到EDTA试管中。上次HBOT会话。

外周血单核细胞(PBMC)分离

使用磷酸盐缓冲盐水(PBS)稀释全血。使用装满Lymphoprep的Leucosep管进行密度梯度分离。然后将试管在25°C下以1000x g离心10分钟。离心后,立即通过移液管收集细胞层(血沉棕黄层),并转移至50 mL锥形离心管中,用足够的1X PBS重悬至50 mL的体积,并在300x g下于25°C离心10分钟。除去上清液后,标记每个样品。

端粒长度

根据Dako PNA / FITC试剂盒规程(代码K5327)标记端粒。在由PBMC(样品细胞)和TCL 1301细胞系(对照细胞)的混合物组成的单细胞悬液中,在没有探针的杂交溶液存在下,在微量离心管中于82°C将DNA变性10分钟。在含有荧光素缀合的PNA端粒探针的杂交溶液中进行电泳。杂交在黑暗中在室温(RT)下进行过夜。杂交后,在40°C用洗涤溶液进行两次10分钟的杂交后杂交。然后在适当的缓冲液中用CD4 +,CD8 +,CD3 +,CD19 +和CD56 +缀合的抗体标记样品,以进行进一步的流式细胞术分析[ 48]49]。每个样品一式两份运行。流式细胞仪分析后,计算CD3 + / CD4 +(T-辅助),CD3 + / CD8 +(T-细胞毒性),CD3 + / CD56 +(天然杀伤力)和CD19 +(B细胞)的相对端粒长度(RTL)。将RTL值计算为每个样品的端粒信号与对照细胞(TCL 1301细胞系)之间的比率,并校正了G0 / 1细胞的DNA指数。使用碘化丙啶染色分别分析样品细胞和对照细胞的DNA倍性,以标准化每个细胞的端粒末端数,从而标准化每个染色体的端粒长度。有关FACS分析示例,请参见图4

T辅助细胞亚群的流鱼数据分析实例。 在数据采集之前,将每个血液样本用PNA探针(b)或不使用(a)进行染色,然后进行抗体染色(CD3,CD4,CD8,CD16,CD19)。

图4. T辅助亚群的流鱼数据分析示例。在数据采集之前,将每个血液样本用PNA探针( b)染色或不使用( a)染色,然后进行抗体染色(CD3,CD4,CD8,CD16,CD19)。

免疫分型

通过流式细胞术分析确定CD3 + CD4 + CD28-无效的T细胞(衰老的T辅助细胞)和CD3 + CD8 + CD28-无效的T细胞(衰老的T细胞毒性)的百分比。PBMC用VioBlue共轭抗CD3,Viogreen共轭抗CD8,PE-VIO 770A共轭抗CD4和APC-VIO 770A抗CD28抗体(Miltenyi Biotec)染色。用MACSQuant流式细胞仪(Miltenyi Biotec)分析细胞。然后计算CD4 +或CD8 + T细胞群中CD28null T细胞的百分比。

缺氧诱导因子(HIF-1alpha)

固定和通透化(Life Technologies)后,用APC偶联的抗HIF1a抗体或相应的同型对照(R&D系统)进行细胞内HIF1a染色用MACSQuant流式细胞仪(Miltenyi Biotec)分析细胞,并确定表达HIF1a的PBMC的百分比。

统计分析

除非另有说明,否则连续数据表示为均值±标准差。使用Kolmogorov-Smirnov检验对所有变量的正态分布进行了检验。进行了单向方差分析,以比较基线时三组之间和之内的变量。

分类数据以数字和百分比表示,并通过卡方检验进行比较。使用Chi-Square / Fisher精确检验进行单变量分析,以识别显着变量(P <0.05)。

为了评估HBOT的作用,使用重复测量ANOVA模型来测试主要的受试者内作用。使用带有Bonferroni校正的t检验对方法进行事后检验,以检验时间差异。

 

 

《总有一种力量它让我们泪流满面》——南方周末1999年新年献词

这是新年的第一天。这是我们与你见面的第777次。祝愿阳光打在你的脸上。

阳光打在你的脸上,温暖留在我们心里。这是冬天里平常的一天。北方的树叶已经落尽,南方的树叶还留在枝上,人们在大街上懒洋洋地走着,或者急匆匆地跑着,每个人都怀着自己的希望,每个人都握紧自己的心事。

本世纪最后的日历正在一页页减去,没有什么可以把人轻易打动。除了真实。人们有理想但也有幻象,人们得到过安慰也蒙受过羞辱,人们曾经不再相信别人也不再相信自己。好在岁月让我们深知“真”的宝贵——真实、真情、真理,它让我们离开凌空蹈虚的乌托邦险境,认清了虚伪和欺骗。尽管,“真实”有时让人难堪,但直面真实的民族是成熟的民族,直面真实的人群是坚强的人群。

没有什么可以轻易把人打动,除了正义的号角。当你面对蒙冤无助的弱者,当你面对专横跋扈的恶人,当你面对足以影响人们一生的社会不公,你就明白正义需要多少代价,正义需要多少勇气。

没有什么可以轻易把人打动,除了内心的爱。没有什么可以轻易把人打动,除了前进的脚步……

这是新年的第一天,就像平常一样,我们与你再次见面,为逝去的一年而感怀,为新来的一年作准备。祝愿阳光打在你的脸上。

因为有你,才有我们。

阳光打在你的脸上,温暖留在我们心里。为什么我们总是眼含泪水,因为我们爱的深沉;为什么我们总是精神抖擞,因为我们爱的深沉;为什么我们总在不断寻求,因为我们爱的深沉。爱这个国家,还有她的人民,他们善良,他们正直,他们懂得相互关怀。

阳光打在你的脸上,温暖留在我们心里。有一种力量,正从你的指尖悄悄袭来,有一种关怀,正从你的眼中轻轻放出。在这个时刻,我们无言以对,惟有祝福:让无力者有力,让悲观者前行,让往前走的继续走,让幸福的人儿更幸福;而我们,则不停为你加油。

我们不停为你加油。因为你的希望就是我们的希望,因为你的苦难就是我们的苦难。我们看着你举起锄头,我们看着你舞动镰刀,我们看着你挥汗如雨,我们看着你谷满粮仓。我们看着你流离失所,我们看着你痛哭流涕,我们看着你中流击水,我们看着你重建家园。我们看着你无奈下岗,我们看着你咬紧牙关,我们看着你风雨度过,我们看着你笑逐颜开……我们看着你,我们不停为你加油,因为我们就是你们的一部分。

总有一种力量它让我们泪流满面,总有一种力量它让我们抖擞精神,总有一种力量它驱使我们不断寻求“正义、爱心、良知”。这种力量来自于你,来自于你们中间的每一个人。

所以,在这样的时候,在这新年的第一天,我们要向你、向你身边的每一个人,说一声,“新年好”!祝愿阳光打在你的脸上。

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素颜霜用不含粉底防晒剂做的产品,因为有裸妆效果而受大家欢迎。本品有SPF15、PA+++的防晒指数,去油光,提亮肤色,不刺眼。参考:《多功能秘密武器,抗油光,不刺眼防晒,调整肤色效果佳

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肩袖损伤与肩周炎的鉴别诊断

如果没有搞清楚肩袖损伤还是肩周炎就治疗,可能会越治越重。

肩袖损伤还是肩周炎有着相似的临床症状,中老年发病,活动时肩关节疼痛、活动受限。肩周炎活动可以减轻疼痛,肩袖损伤开始时也是。但,越是运动越肩袖损伤会更重。

当肩袖损伤被当作“肩周炎”治疗,做推拿、理疗、中药、针灸、封闭等,也每天坚持锻炼,爬墙、拉吊环、棍棒操、绳操……仍不见好转时。必须注意:是否诊断错误?

肩袖损伤的典型症状:肩关节外展疼痛,无力,胳臂抬不起来,夜间睡觉经常会痛醒,不能侧卧。

什么是肩袖? ——肩袖是覆盖于肩关节前、上、后方之肩胛下肌、冈上肌、冈下肌、小圆肌等肌腱组织的总称, 它们呈袖套状包绕肱骨头,故称之为肩袖。肩袖位于肩峰和肱骨头之间,主要功能是帮助肩关节稳定和肩关节运动,保护肱骨头不受三角肌牵拉上移,避免与肩峰撞击,这是一组十分重要的结构。但肩袖也是一种非常容易受到损伤和撕裂的组织。

肩袖损伤在60岁以上由于肩痛为主诉而就诊的老年人病人中非常常见,患病率高达70%以上,远远高于所谓的“肩周炎”。过去,由于对这类疾病认识上的局限性和误区,大多数病人被误诊为“肩周炎”,造成治疗失误和病人痛苦。事实上,肩痛的原因很多,肩袖损伤是很常见的原因之一。

肩袖损伤机制分为急性撕裂伤和慢性劳损伤两种。急性撕裂伤常见于猛提重物、摔倒时肩部支撑、外来暴力牵拉等,如公共汽车上手扶拉杆站立的乘客,突然遇急刹车时失去身体平衡等,就有可能造成肩袖撕裂伤。慢性劳损伤常见于曾经摔伤,上肢撑地或用力提拉重物后引起。经常参加体育运动,曾经拉伤过肩关节,或过度使用上肢后引起;在长期从事网球、棒球、羽毛球、游泳、登山等需要上肢举过头顶的运动人群中也较为多见。

肩袖损伤主要表现为肩外展上举时疼痛,损伤严重的患肩因为肩关节上举无力,需要对侧手帮助才能完成上抬动作,有时候可能会有程度较轻的肩关节活动受限合并存在。功能锻炼无助于肩袖撕裂的止痛。如果误认为“肩周炎”,让肩袖撕裂的患者继续进行“爬墙”等运动锻炼,或人为地强行手法松解肩关节,可能会造成肩袖裂口继续扩大,最后形成巨大的或不可修复的肩袖撕裂,加重伤情,这是一种致残性很高的疾病,应引起重视。

那么肩痛的原因一定是肩袖损伤吗?当然不是。过去,人们(包括骨科医生)对肩袖损伤认识不足,许多肩袖损伤被当作“肩周炎”而没有得到恰当的治疗,但“肩周炎”患者还是很多的。“肩周炎”这一概念,现在我们称之为“冻结肩”,属于肩关节僵硬这一范畴。肩关节僵硬包括原发性肩关节僵硬、继发性肩关节僵硬、创伤性肩关节僵硬等多种情况,在临床上需要进行鉴别,而予以相应的处理。对于“肩痛”,过去一律是“肩周炎”,现在一律是肩袖损伤,我们认为是不可取,也是不科学的。

肩关节僵硬也表现为肩关节疼痛、活动受限。但其特点为主动活动、被动活动均受限,关节各个方向活动均明显受限,活动受限更为突出。当然,肩袖损伤与肩关节僵硬可以合并存在,此时核磁共振检查有重要的意义。

肩袖损伤与“肩周炎”,均可以在关节镜下微创治疗,但手术策略和术后的康复方法是不一样的。因此,临床上详细的检查、准确的诊断对选择合适的治疗是极为重要的。

世界观不同世界就是不同,新冠病毒流行期间的思考

疫情期间,大学同学群里与其他微信群没什么两样,大家争吵不休。我发现很多中国医生与很多美国医生在世界观上有很大的差距。用一位同学的评论:“他们只相信自己愿意相信的东西!先站队,然后选择性的接受信息。”

人一站队,智商就归零。我们这群高考成绩非常优秀的同学,应该没有弱智的(与现在80%以上的录取率不同,1979年是史上第二难的高考,录取率不到6%,中山医学院是当时中国四大重点医学院),但讨论新冠病毒时,竟然有许多不经大脑的、没有常识的发言。

一、戴口罩问题其实是三观问题

欧美感染人数不断增长,意大利西班牙、英美法国死亡率超过了10%,美国感染人数朝100万进军,这样的数据让人悲衰。这段时间,我一直在想一个很简单的问题,戴口罩隔离就可以预防新冠病毒,为什么对欧美人这么难?他们的医生在电视上教大家预防新冠病毒,竟然戴手套不戴口罩。预防呼吸道传染病,戴手套不戴口罩,这是什么逻辑?

新冠病毒在考验各国政府与人民的三观,在短期效果来看,中国是正确的、高效的,而欧美国家的许多做法让人大跌眼镜。但长期效果我们英不知道谁更正确?

病毒在考验各国领导人的智慧,我很好奇,为什么美国病毒大流行特朗普的支持率反而更高,一位纽约的大学同学如此告诉我:

▲一位在纽约的大学同学的观点

也许特朗普推广羟氯喹在美国医生们看来是明智的,但他为什么也不建议戴口罩?为什么戴口罩预防呼吸道传染病这么简单的事对欧美人这么难?——我想,这可能与他们的三观有关。当人生观、世界观、价值观不同,我们做出的选择一定不同。


▲美国密歇根州戴口罩的持枪示威者

看新闻,美国有些州出现了示威集会。看到照片后我好像明白为什么他们不建议戴口罩了。


▲美国密歇根州蒙脸与不蒙脸的持枪示威者

欧美有“禁蒙脸法”,欧美人不戴口罩是有原因的。他们允许个人持枪,所以就得有禁蒙面法来对冲?也许在他们的三观里,除了病人戴口罩,普通人蒙脸非但违背习俗,甚至是违法的,只有暴徒和准备实施犯罪时才需要面蒙,所以他们打死不肯戴口罩?领导人更不能戴口罩?……

我没在欧美生活过,我真不知道他们的逻辑。在大学的同学群里,国外的医生与国内的医生为各种小事争吵不休,最后都能上升到“三观不合”这样重大的问题上,造成情感撕裂。我想起稻盛和夫的提问:“作为人,何为正确?”

二、世界观不同世界就是不同

稻盛和夫是经营之神,创立过两家世界500强公司,78岁时,应日本政府的邀请,接手破产的日本航空,一年后公司起死回生。在稻盛和夫看来,经营企业是非常简单的事,他认为,经营失败,主要是三观不正确。

所谓世界观,是对世界的基本看法和观点。以前,人们认为地球是平的,哥白尼认为是圆的,被活生生烧死了;麦哲伦相信哥白尼,第一个环绕地球转了一圈。世界观不同世界真的不同。

哥白尼被烧死,因为他对世界的看法和观点与大家不同。新冠病毒流行期间大家为病毒的起源,方方的日记、新闻发言人的言论、官员的态度、各种防治的方法,甚至戴不戴口罩……争吵不休。世界观不同其实是人类战争的根源。

各个国家的人们三观不同,这次我们深刻地见识了。由于三观不同,各国防治新冠病毒的方法也不同。本来,八仙过海各显神通,大家都没有批评别人的资格。家家有本难念的经啊,不是吗?

但戴口罩是预防呼吸道病毒最重要的方法,如果法律、文化、风俗违背了科学,那么,应该修改的是法律、文化、风俗,而不是修改科学。

修改法律、文化、风俗很难,因为需要修改一个国家一个民族的三观和认识!

有一个困绕了我20年的法律难题,我一直看不到方向。但我最近只是改变了一下世界观,就轻易解决了。值得纪念的2020年4月16日,这天我说了一句妙语:世界观不同世界就是不同!

三、跑不赢平均寿命的医生都不是及格的医生?

昨天看到许志恩同学写了篇文章《医生是终身的病人》,他多病,故感慨。我告诉他:“如果许兄用多些世界观看病,你这病也许很容易的。我病多,所以经验也多。”

说“十男九痔”这种最常见的病吧,我大学时就已经发病了,到46岁时,严重到一年有半年便血。但之后,因为患了肿瘤,我改变了自己的生活方式与饮食结构,结果12年过去,痔疮几乎没有再复发,我都忘记它的存在了。但我知道,一个人要改变自己的生活方式与饮食方式非常困难,他得改变了自己的三观。

当年SARS流行,一位生化博士的同学为了让我相信护肤品可以抗衰老,与我讨论了2个月,还带我去见了他的导师……后来我做出了一个改变我自己三观的护肤品。我的感悟是:如果你在这问题上三观正确,也可以像我一样,瘦到有几块腹肌,但也许60岁眼部可以没有皱纹。

这位同学在大学时就提出了“思维病”这样的概念,认为思维方式可以致病。我站在另外的角度,认为思维方式可以治病。

我写过篇《凡有哲学,皆可治病;凡有哲学,皆可致病》,认为有智慧的人,起码要活过87岁。翻查美国医生的平均寿命就知道,这其实很难。美国医学公认最发达,但他们的医生只是比常人多活一岁(《希氏内科学》资料)。这次新冠病毒流行,某些发达国家超高的病死率让世界大跌眼镜。他们出了什么问题我不知道,但看同学群里中国医生与美国医生辩论争吵,我会反省自己学过的医学,我不认为都是正确的。

查理总是嘲笑哈佛大学的金融高材生与教授,因为他们跑不赢道琼斯指数。其实,同样可以嘲笑哈佛大学的医学高材生与教授,因为他们也没有把握跑赢平均寿命。从高处看,跑不赢平均寿命的医生都不是及格的医生?

四、宅家的好处是思考

张文宏的金句:“闷两个礼拜,少说话,思想就出来了。”——宅家的好处是思考,这是一种修行。传说中,武林高手都是通过闭关提高修为的。

当年SARS流行期间,受生化博士的同学启发,我做出了一个改变我自己三观的护肤品,消除了自己眼部的皱纹与脸上常年的脱皮。

这次新冠病毒流行期间,结果,我做出了抗皱效果比原来眼霜更强2倍以上的产品,我想,我也许可以保持腹肌,60岁,甚至65岁以上没有皱纹。

眼霜问题其实也是三观问题?因为三观决定你的选择,决定你的生活方式….等等。别说眼霜如此复杂的产品,就是防晒霜这么简单的产品,99%的美女选不到及格标准(不刺眼、 不退减、PA++++、SPF>15) 的,因为他们只知道单一看SPF,还以为越高越好。

我一向认为医生得有两种以上的世界观,如同查理认为金融分析师得有多元学科智慧。这次疫情,看到了一种世界观的同学可能会智商归零,更坚定了多元哲学的观点。所谓中庸,不是中和,而是权衡。时左时右,有时中立,有时左右开弓。

我近年写东西并不想让更多人看,所以设置了密码。曾经和同学讨论哲学问题,写了篇《所谓哲学家,是有双重以上哲学系统的人》,我让5位同学看了,没想他们发表的评论比我原文的字数还多,而我在后台看到有近2000的浏览量,也不知同学们转到哪去讨论了。谈到三观,注定会引起巨大争议,无论政府还是民间。

关于眼纹这件事,真正的美人,都有对抗时间的法宝

龙吉好不容易写了篇关于如何用眼霜消除眼纹的小文,自己却很不满意,说让我改改。我说:我俩文字风格不一样,你的文章我改不了,不如我加个前言吧。结果我写了风牛马不相及的另一篇《世界观不同世界就是不同,新冠病毒流行期间的思考》,我认为,能不能护理好皮肤能不能用好眼霜是世界观问题。(陈崇坚)

关于眼纹这件事,真正的美人,都有对抗时间的法宝

前些天收到一位妹妹发的私信,她发的是使用护花呤四个月后的对比图,如下:左图可以看到,之前她眼部皱纹问题很严重。

▲河南美女L,用护花呤眼霜4个多月的比较

据她说之前用了很多眼霜,其中不乏价格昂贵的大牌,每一支价格都足以让人肉疼!但关键问题是:钱花了,效果却看不见。该生的干纹继续生,说好的祛皱也没祛,眼见着眼部肌肤一天天松弛下来,细纹肆虐眼周,鱼尾纹笑傲眼尾,皮肤还变得敏感脆弱。

去年她听朋友介绍开始,抱着试一试的态度,开始用护花呤眼霜,几个月用下来,觉得眼部变化很大,特地将使用前后的对比照发给我看。

我看到她眼部的细纹确实少了很多,眼底的饱满肉眼可见,最难得的,让人容易忽视显得整个人老气沉沉的下眼睑的长条纹路也消失了,只有一条自然折痕。皮肤从发红敏感状态变得稳定,之前有些松弛膨胀的皮肤也显得细腻紧致了。

能感受到她内心的兴奋和她小小的得意,这对我们坚持做产品的人来说,是莫大的鼓励。征求她同意后,将她的护肤故事写出来,也将我怎样指导她减少细纹的小方法分享给大家。

岁月流逝,时光的痕迹在眼部体现和堆积。眼部保养得宜,你的眼部第一道皱纹,可以比同龄人来的晚一些,再晚一些。眼周围的肌肤保养,说来既容易又不容易。

不容易在于:眼部皮肤薄,又缺少皮脂腺汗腺分泌油脂滋润皮肤,加上经常眨眼,做表情,眼部化妆卸妆,都会拉扯牵动皮肤,所以特别容易起干纹细纹。容易在于,保养好的指标相对单一:无皱纹紧致就算过关。不像面部其他区域,要担心长斑、长痘、毛孔粗大,黑头、等问题。

如何防止和减少眼部的细纹

很多人会问:那么,如何防止和减少眼部的细纹呢?同样用眼霜,为何我的眼部细纹还是那么多,别人的眼纹为何那么少呢?为什么我厚涂眼霜了,还是解决不了眼纹问题呢?那么,我就来讲讲我的护肤程序,很多眼部纹路比较多比较顽固的客户就是按照这个方法来减少眼纹的,也有更多熟龄肌肤是用这个方法来预防皱纹的产生的。

眼部拍足够的护肤水

方法:将护肤水倒在手心,用另外一只手的手指头粘水后轻拍眼周,促进吸收;建议拍三到四遍,直到皮肤吸收不进为止。不建议用化妆棉,这样很浪费,如果是敏感肌,长期和异物摩搽容易加重敏感。

作用区域:眼睛四周的肌肤,可适当扩大肌肤范围,尤其上眼皮不可忽视。

建议产品:护花呤柔肤水

用眼霜前,一定要找一款能用于眼部的护肤水,让皮肤充分湿润,后续护肤品才能有效吸收,也不容易长油脂粒。

足量眼霜用于眼部。

方法:挤出一到两颗黄豆量大小。白天,无名指轻轻按摩,促进吸收。晚间,厚涂即可,无须按摩。

建议产品:护花呤抗皱精华眼霜

随着年龄增加,可适度增加用量;

在涂上眼皮时,要闭上眼睛,在涂下眼睑时,要睁开眼睛齐着下眼睑涂抹,这样涂眼霜不会造成有空白地带。如果闭上眼,由于睫毛的阻挡,下眼睑很多位置无法涂到,容易出现田字纹。

叠加使用保湿产品

如果您眼部干燥,容易起干纹,强烈建议不要错过这一步骤。

方法:取适量产品,先使用凝露类的补水产品,再用有锁水能力的保湿滋润霜,保证眼部肌肤处于湿润状态且不易干燥。

建议产品:护花呤水盈丝润凝露 护花呤舒缓滋润保湿霜

叠加保湿产品这个步骤很关键, 我们大多数人在面部用护肤品的时候,感觉干燥会毫不犹豫地加保湿产品,但是护理眼部的时候,很多人感觉干燥以为厚涂眼霜就行了,没有加保湿产品的习惯。

其实眼部皮肤薄,又缺乏皮脂腺汗腺,容易干燥缺水导致起纹,所以,更需要加保湿产品,用了眼霜后,后续叠加保温,比单独厚涂眼霜效果更好。

由此可见,护肤保养,并不是越贵的产品用得越多越好,做好皮肤保养,关键是要找对路子,错误的方法,可能适得其反。正确的方法,可能事半功倍又简单。

备注:叠加保湿这个步骤适合细纹干纹偏多的肌肤,如果年轻肌肤单用眼霜厚涂就可以解决问题,就可以省略这个步骤,选用眼部护肤精简流程。

眼部护肤精简流程

有很多新手妹妹、年轻上班族,眼部没有太多问题,但是需要未雨绸缪,在细纹没有出现前就扑灭,可以选用精简的眼部护理流程。眼部护肤,可在面部护肤时顺便进行。

建议产品:护花呤柔肤水,护花呤眼霜/绿晚霜(特地研发适合眼部保养的面霜)。

综上,时间从容的姐妹们,可以使用眼部完整流程;节奏快的姐妹,使用精简流程;也可白天使用精简流程,晚上使用完整流程。

眼部保养就是2个法宝:好的眼霜产品,和合适的方法。

继续浏览世界观不同世界就是不同,新冠病毒流行期间的思考

三个方法–脸部净透无暇–我的DIY去黑头方法

很多人问我怎么去黑头,我一直没有写,觉得有什么可写的啊,有黑头说明代谢旺盛说明正年轻啊,做好清洁控油就好了。我还要研究50岁后怎样仍然少女这么伟大的人类终级问题,这样的问题才棘手才有挑战性啊,黑头只是小事一桩。而且,关于怎样去黑头,现在的护肤达人,红人博主的去黑头小方法,就是早在十几年前我在护花呤护肤论坛写过,也在报纸上发过了。

后来想想,每个年龄觉得是问题的,可能真的对那个的年纪来说很重要。20多岁在意皮肤出油有黑头,因为那时皮肤出油有黑头是当时最难过的事,30岁在意斑点细纹,因为斑点细纹是那时最难过的事,40岁以后在意下垂松弛等,回头再看,20岁的痘痘算什么呀~很像人生呢,当下的痛苦都只是当下罢了,很多年过后再回头看,不过是稀疏平常很简单的事情,但是在当时,那些问题就是天大的问题,过不去就是过不去。

反过来说,黑头这种问题,也只能是年轻才有的烦恼吧。
所以,让我以过来人的经验,为尚年轻的你们,好好谈谈黑头。

大家最关心的问题就是:能不能让黑头不再产生,一劳永逸呢?答案是不能。只要活着,就会油脂分泌,就会产生黑头。

黑头形成的原因

黑头是是一种开放式粉刺,当毛孔中的油脂未能得到及时清除,堵在毛孔开口的地方,混合细胞屑和微生物形成的硬化的栓塞物,顶部再和和空气中的尘埃污垢混合氧化变黑,成为黑头,黑头需要和多根毳毛在一起的小棘毛雍症鉴别。

左图:鼻子上的黑头有油脂硬化栓塞而成

右图:小棘毛雍症顶部有毳毛聚集露出

黑头出现,与年龄、天气、饮食、清洁习惯、工作环境等生活细节综合相关。

一般来说,黑头多发生于油脂分泌旺盛的青少年时期;夏天来了,天气炎热,容易有黑头;饮食高热量高脂肪,容易有黑头;清洁不到位,容易有黑头;工作生活环境粉尘多,比如长期面对电脑、机房等,也很容易有黑头。

既然黑头的产生无法改变,那么就说明我们对黑头束手无策了吗?

当然不。

我们可以在黑头产生前,进行【有效预防】,也可以在黑头产生后,采取【正确措施】不断减少黑头,也即【事前预防,事后阻击】的道理。

事先预防的正确做法如下

1:饮食调整:饮食宜适当清淡,多吃青菜,减少辛辣剌激高热量高脂肪的摄入。——内在调理身体洁净度,这是源头。

2:合理作息——保持身体良好运转,这是动力。

3:做好清洁:用温水洗脸,选用洗得干净又控油的氨基酸清洁产品。——这是外在皮肤清洁,必不可少。

4:适当补充维生素B6,葡萄糖酸锌和维生素AD。——保持身体良好的营养成分供给。

那么事后阻击黑头的话,应该怎么做呢?

现在已知的去黑头方法,比如撕拉鼻贴去黑头,挤压去黑头,黑头导出液,都各有各的弊端,所以我并不建议和提倡使用。

撕拉鼻贴去黑头,对皮肤有拉扯,会导致毛孔口松驰变大。挤压去黑头容易出现挤压损伤,导致皮肤发炎。黑头导出液大多是水杨酸果酸等通过化学剥夺损伤角质层,容易造成皮肤屏障受损,皮肤敏感。

我的DIY去黑头法,大家试试看

综上,所以我比较推荐我的DIY去黑头法,大家不妨一试。

DIY去黑头所需工具:净润洗面奶,霍霍巴油(可用抗皱精华油代替)一次性棉柔巾,食用细盐, 50-60度的热水。

具体步骤:

首先用热水将棉柔巾充分打湿,拧半干,用手拿着热棉柔巾敷在鼻尖黑头多的地方,将棉柔巾夹住贴在鼻子上1分钟,通过局部加热让毛孔打开,让硬化的角栓软化,然后根据黑头多少选择下面的方案:

1、用洗面奶去黑头,如果黑头不多,日常可以用洗面奶去黑头,做完第一步后,在黑头多的地方厚涂上净润洁面乳,让产品停留一两分钟左右,再用热毛巾敷在鼻尖上半分钟后,用温热的毛巾将洗面奶抹开,然后用食指和中指掂着棉柔巾轻轻揉洗,打出细腻的泡沫后,洗干净,立即拍上护肤水再进行后续护肤程序,此方法适合所有肤质。

2、用油去黑头,如果黑头比较多,做完第一步后,在黑头多的地方涂上霍霍巴油,建议选择霍霍巴油,因为分子量小渗透力强,不要选择婴儿油,因为婴儿油比较厚重无法吸收反而容易形成新角栓,用美容指打圈轻轻按摩2分钟,然后涂上洗面奶,用温热的水洗干净后再护肤。

3、用油加细盐去黑头 如果黑头多而顽固,做完第一步后,在霍霍巴油里加入20-30粒细盐,将油和细盐混合,在鼻尖黑头多的地方按摩2分钟,然后用湿的棉柔巾将盐抹去,涂上洁面乳后用温热的水洗干净再护肤。此方法敏感皮肤慎用。

没有黑头的皮肤看起来真干净啊,我就是这样去黑头的,我是干性敏感皮肤,第1和第2个方案经常用到,大概一个月一到两次,第3个方案大概一年用一到两次,希望对大家有参考价值起到帮助。

关于试用装、会员制、微信促销

一、试用装

护花呤产品《有试用装,试用7天,不满意退货,全额退款》,购买产品前请仔细阅读《退货与退款流程、换货具体方法

二、会员制

护花呤2002年开始经营,一开始就有两个特点:一是《有试用装,试用7天,不满意退货,全额退款》,二是会员制度。会员制度设立的目的是为用得好并长期使用的顾客提供更多的优惠。点击查看《护花呤会员制度

三、微信公众号发布优惠通知

建议会员长按以下二维码关注护花呤公众号(hu-2002)。护花呤微信公众号是服务号,每月只能发4次信息,仅限于新品、优惠等重要内容。

参考《常见的促销日外,护花呤公众号每月发1-2款当季产品优惠信息

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